ایلیسا کٹس کیسے کام کرتی ہیں
Jun 05, 2019
ڈبل اینٹی باڈی سینڈویچ کا طریقہ 1۔ پیکیج: 0.05mph9 کے ساتھ۔ کاربونیٹ پیک کو اینٹی باڈی کو 1 سے 10؟ g/ml کے پروٹین کے مواد میں کمزور کرنے کے لئے بفر کیا گیا ہے۔ ہر پولی اسٹیرن پلیٹ کے رد عمل کے سوراخوں میں ، راتوں رات 0.1 ملی لیٹر ، 4 ڈگری سینٹی گریڈ شامل کریں۔ اگلے دن ، سوراخ میں حل کو ضائع کردیں اور اسے ہر بار 3 منٹ تک دھونے والے بفر کے ساتھ 3 بار دھو لیں۔
۔
(ایک ہی وقت میں خالی سوراخ ، منفی کنٹرول ہول اور مثبت کنٹرول ہول کریں) . 3. انزائم - لیبل لگا ہوا اینٹی باڈیز شامل کریں: ہر رد عمل کے سوراخ میں ، ایک تازہ پتلی انزائم {2} 2}} لیبل لگا ہوا اینٹی باڈی (ٹائٹریشن کے بعد دباؤ) شامل کریں۔
0.5 سے 1 گھنٹہ 37 ڈگری سینٹی گریڈ پر انکیوبیٹ کریں اور دھوئیں۔
4. سبسٹریٹ مائع رنگین ڈسپلے شامل کریں: ہر رد عمل کے سوراخ میں ٹی ایم بی سبسٹریٹ حل 0.1 ملی لیٹر ، 37 ڈگری C 10 سے 30 منٹ کی عارضی تیاری شامل کریں۔
5. اختتامی رد عمل: ہر رد عمل کے سوراخ میں 2m سلفورک ایسڈ 0.05 ملی لیٹر شامل کریں . 6.} نتائج کا تعین: ایک سفید پس منظر پر ، براہ راست ننگے آنکھ کے ساتھ ، نتائج کا مشاہدہ کرنے کے لئے براہ راست ننگی آنکھ کے ساتھ: رد عمل کے سوراخ کے اندر گہرا رنگ ، مثبت ڈگری کا رنگین یا بہت ہی اتلی ہے ، رنگین کے مطابق رنگ کے مطابق رنگ کی عکاسی ہوتی ہے ، رنگین کے مطابق رنگ کی عکاسی ہوتی ہے۔
اوڈ ویلیو اسکینٹڈ: ایلیسا ٹیسٹر پر ، 450nm پر (اگر ایک BTS رنگین پیش کرنا ، پھر 410nm) ، خالی کنٹرول ہول صفر کے لئے ہر سوراخ کی OD قدر کی پیمائش کرنے کے لئے ، اگر 2.1 بار کی مخصوص منفی کنٹرول OD قیمت سے زیادہ ، یعنی مثبت ہے۔
بالواسطہ قانون
1. معلوم اینٹیجن کو 1 سے 10 ملی گرام/ملی لیٹر ، فی ہول پلس 0.1 ملی لیٹر ، 4 ڈگری سینٹی گریڈ راتوں رات کو کم کرنے کے لئے پیکیج کا استعمال کریں۔
2. اگلے دن 3 بار دھوئے ؛
3. مندرجہ بالا - میں 0.1 ملی لیٹر کے نمونے (نامعلوم اینٹی باڈی) کی ایک خاص کمزوری شامل کریں ، جس میں پیکیجڈ ری ایکشن ہول کا ذکر کیا گیا ہے ، 37 ڈگری سینٹی گریڈ پر 1 گھنٹہ تک انکیوبیٹ کریں ، واش ؛
4.
5.37 ڈگری سی انکیوبیشن 35-60 منٹ ، دھونے ؛
6. 'آخری بار جب آپ DDW سے دھوتے ہو۔ باقی اقدامات 4 ، 5 ، 6 کے "ڈبل اینٹی باڈی سینڈویچ کے طریقہ کار" کی طرح ہیں۔

